本發(fā)明涉及中藥、天然藥物制藥領(lǐng)域，尤其涉及一種雪松松針中同時(shí)制備莽草酸和總黃酮的方法。

背景技術(shù)：

松針為松科植物的多個(gè)品種的針狀葉，全世界松科植物共有10個(gè)屬230余種，我國(guó)松樹(shù)有10個(gè)屬120余種，雪松是可供藥用的13種松樹(shù)之一（劉東彥,石曉峰《藥用松針的研究進(jìn)展·中藥材》,2012,35(10):1701），其針葉藥用歷史悠久，主要化學(xué)成分為黃酮類(lèi)、苯丙素類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)、三萜類(lèi)、甾體類(lèi)、多糖及針葉膠等，具有抗腫瘤、抗氧化、改善記憶、抗菌及抗病毒、毒殺蚊蟲(chóng)等多種功效（白朝輝,石曉峰,劉東彥,等《雪松松針的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展·中國(guó)藥師》,2012,15(12):1791）。經(jīng)前期對(duì)雪松松針化學(xué)成分的系統(tǒng)研究發(fā)現(xiàn)，雪松松針中含有大量的莽草酸（王東東,石曉峰,李沖,等《7種松柏科植物中莽草酸的含量測(cè)定·中國(guó)藥房》,2011,22(7):616-618.沈薇,石曉峰,王東東,等《正交試驗(yàn)優(yōu)選雪松松針中莽草酸的提取工藝·中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志》,2011,28(10):831-834.）和黃酮類(lèi)化合物（劉東彥,石曉峰,王東東,等《雪松松針黃酮類(lèi)化學(xué)成分的研究·中草藥》,2011,42(4):631-633；liudy,shixf,wangdd,etal《anewflavonoidinpineneedlesofcedrusdeodara·chineseherbalmedicines》,2011,3(1):5-6.；liudy,shixf,wangdd,etal《twonewmyricetinglycosidesfrompineneedlesofcedrusdeodara·chemistryofnaturalcompound》,2011,47(5):704-707；劉東彥,石曉峰,李沖,等《雪松松針醋酸乙酯部位化學(xué)成分研究·中草藥》，2011,42(10):1921-1924）。而文獻(xiàn)報(bào)道莽草酸具有抗腫瘤和對(duì)心腦血管的作用，是抗禽流感藥達(dá)菲的主要合成原料（張軍民,石曉峰《天然產(chǎn)物莽草酸的研究進(jìn)展·中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志》,2011,18(2):109-112.）；黃酮類(lèi)化合物是高效、天然、毒副作用較小的抗腫瘤藥物，還具消炎、抑菌、降血脂和防衰老等多種生物功效（李湘洲,欒芳菲,張勝,等《黃酮類(lèi)化合物的抗腫瘤和抗血管生成作用研究進(jìn)展·食品與機(jī)械》,2016,32(1):199-201.），研究發(fā)現(xiàn)雪松松針總黃酮對(duì)人宮頸癌hela細(xì)胞株、人胃癌mkn45細(xì)胞株、人肺癌a549細(xì)胞株、人肝癌hepg2細(xì)胞株及人膠質(zhì)瘤shg44細(xì)胞株均有選擇性抑制作用，且對(duì)hepg2細(xì)胞增殖抑制作用最顯著，當(dāng)雪松松針總黃酮濃度為100μg/ml時(shí)，對(duì)其抑制率為(50.94±6.11)%（xiaofengshi,dongyanliu,junminzhang,etal.《extractionandpurificationoftotalflavonoidsfrompineneedlesofcedrusdeodaracontributetoanti-tumorinvitro.bmccomplementaryandalternativemedicine》,2016,16.245-253）。目前，對(duì)于雪松松針中莽草酸和總黃酮的制備，除了《從雪松松針中提取、分離、純化莽草酸的生產(chǎn)工藝》（專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枺?01010174776.7）和《一種雪松松針總黃酮的富集方法及其在抗腫瘤中的應(yīng)用》（專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枺?01511007948.0），未見(jiàn)雪松松針中同時(shí)制備莽草酸和總黃酮的方法的相關(guān)報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種方法簡(jiǎn)單、易于實(shí)施的雪松松針中同時(shí)制備莽草酸和總黃酮的方法。

為解決上述問(wèn)題，本發(fā)明所述的一種雪松松針中同時(shí)制備莽草酸和總黃酮的方法，包括以下步驟：

⑴將新采集的雪松松針置陰涼處，涼干，得到干燥的雪松松針；該干燥的雪松松針中加入其重量10~20倍的自來(lái)水，經(jīng)回流提取、過(guò)濾，合并提取液，得到雪松松針?biāo)嵋海?/p>

⑵所述雪松松針?biāo)嵋涸趬毫?.075mpa、水浴溫度95℃條件下進(jìn)行減壓濃縮水液，分別按照固液比1:3、乙醇體積濃度70%和固液比1:1、乙醇體積濃度85%醇沉二次，即得雪松松針醇沉液；

⑶所述雪松松針醇沉液經(jīng)減壓回收乙醇至無(wú)醇味，得60℃熱測(cè)密度為1.05~1.10的流浸膏；

⑷所述流浸膏分散于其質(zhì)量3~5倍的水中，經(jīng)超聲溶解，得到雪松松針莽草酸和總黃酮粗提液；

⑸已預(yù)處理好的大孔吸附樹(shù)脂濕法裝柱后，將所述雪松松針莽草酸和總黃酮粗提液以4~12bv/h流速上樣，收集未吸附流出液；先用2~4bv的水洗脫所述大孔吸附樹(shù)脂柱，收集水洗液；然后將水洗后的所述大孔吸附樹(shù)脂柱以4~12bv/h流速用體積濃度為70~95%的乙醇洗柱，收集乙醇洗脫液；

⑹合并所述未吸附流出液和所述水洗液；合并后的所述流出液和所述水洗液經(jīng)減壓蒸干，得到純度達(dá)30%的莽草酸粗品；該莽草酸粗品分散于其質(zhì)量4~8倍的甲醇中，經(jīng)超聲溶解，過(guò)濾除去不溶物，與硅膠拌樣，裝柱，用二氯甲烷-甲醇-乙酸溶液快速淋洗，收集洗脫液，該洗脫液經(jīng)減壓蒸干溶劑，得到純度達(dá)80%的莽草酸近白色固體；所述莽草酸近白色固體經(jīng)二氯甲烷-甲醇溶液重結(jié)晶得到莽草酸產(chǎn)品；

⑺所述乙醇洗脫液經(jīng)減壓蒸干，得到純度超過(guò)50%的雪松松針總黃酮。

所述步驟⑴中回流提取的條件是指壓力0.075mpa、溫度為90~95℃，提取次數(shù)為2次，每次2h。

所述步驟⑶中減壓回收的條件是指壓力0.075mpa，水浴溫度50~60℃。

所述步驟⑷和所述步驟⑹中超聲溶解的條件均是指功率為40khz，溫度為40~50℃。

所述步驟⑸中大孔樹(shù)脂是指d101、xad1180、ab-8、xad7hp、xad761、hpd722型大孔樹(shù)脂中的任意一種。

所述步驟⑹中拌樣硅膠質(zhì)量比為1：2~10。

所述步驟⑹中二氯甲烷-甲醇-乙酸溶液是指將二氯甲烷、甲醇、乙酸按15：1：0.1~9：1：0.2的體積比混合而成的溶液。

所述步驟⑹和所述步驟⑺中的減壓蒸干的條件是指壓力0.075mpa，水浴溫度50~60℃。

所述步驟⑹中二氯甲烷-甲醇溶液是指將二氯甲烷、甲醇按5：1~2：1的體積比混合而成的溶液。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)：

1、本發(fā)明專(zhuān)利與現(xiàn)有技術(shù)（專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枺?01010174776.7和專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枺?01511007948.0）相比，首先，對(duì)提取溶劑進(jìn)行了優(yōu)化，采用水提取雪松松針，不僅莽草酸的含量高，而且更易于生產(chǎn)；其次，將溶劑萃取優(yōu)化為醇沉和大孔吸附樹(shù)脂柱層析，該優(yōu)化步驟莽草酸基本無(wú)損失，回收率在99%以上，僅用到水和乙醇試劑，具有安全、高效、成本低、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)；篩選了新的硅膠柱淋洗條件，不僅莽草酸的純度高，同時(shí)大大提高了莽草酸的產(chǎn)率；水提液經(jīng)醇沉，可得到雪松松針粗多糖，醇沉液經(jīng)大孔吸附樹(shù)脂柱純化莽草酸的同時(shí)，乙醇洗脫液經(jīng)濃縮可得到高純度的雪松松針總黃酮，實(shí)現(xiàn)了雪松松針的高值化利用。

2、本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單，成本低，重復(fù)性高，易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1一種雪松松針中同時(shí)制備莽草酸和總黃酮的方法，包括以下步驟：

⑴將新采集的雪松松針置陰涼處，涼干，得到干燥的雪松松針。取0.3kg干燥的雪松松針置于上海雅程儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的yc-10型多功能提取罐中，加入其重量15倍的自來(lái)水，于壓力0.075mpa、90℃回流提取2次，每次2h后過(guò)濾，合并提取液，得到雪松松針?biāo)嵋杭八幵Ｋ幵栏捎糜谧龃继嵝O性化合物的原料。

⑵雪松松針?biāo)嵋涸趬毫?.075mpa、水浴溫度95℃條件下采用上海雅程儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的yc-10型多功能提取罐進(jìn)行減壓濃縮水液，分別按照固液比1:3(900ml)、乙醇體積濃度70%和固液比1:1(300ml)、乙醇體積濃度85%醇沉二次，即得雪松松針醇沉液。

⑶雪松松針醇沉液于壓力0.065mpa、水浴溫度60℃的條件下采用上海雅程儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的yc-10型多功能提取罐經(jīng)減壓回收乙醇至無(wú)醇味，得60℃熱測(cè)密度為1.05的流浸膏54.42g；同時(shí)回收乙醇經(jīng)處理再次使用。。

⑷流浸膏分散于其質(zhì)量3倍的水中，用昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)的kq2200b超聲清洗儀器于功率為40khz、溫度為50℃的條件下經(jīng)超聲溶解，得到雪松松針莽草酸和總黃酮濃度分別為23.18mg/ml和13.92mg/ml的粗提液。

⑸已預(yù)處理好的hpd722型大孔吸附樹(shù)脂濕法裝柱后，將雪松松針莽草酸和總黃酮粗提液以8bv/h流速上樣，收集未吸附流出液；先用2bv的水洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，收集水洗液；然后將水洗后的大孔吸附樹(shù)脂柱以4bv/h流速用體積濃度為80%的乙醇洗柱，收集乙醇洗脫液。

⑹合并未吸附流出液和水洗液；合并后的流出液和水洗液采用河南鞏義市予華儀器有限公司生產(chǎn)的re-501型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在壓力0.075mpa，水浴溫度55℃條件下經(jīng)減壓蒸干，得到純度達(dá)30%的莽草酸粗品40.90g；該莽草酸粗品分散于其質(zhì)量4倍的甲醇中，用昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)的kq2200b超聲清洗儀器于功率為40khz、溫度為45℃的條件下經(jīng)超聲溶解，過(guò)濾除去不溶物，與100~200目硅膠拌樣，裝柱，用二氯甲烷-甲醇-乙酸溶液快速淋洗，按1bv/瓶收集，共收集20bv的洗脫液，該洗脫液于壓力0.075mpa、水浴溫度50℃的條件下經(jīng)減壓蒸干溶劑，經(jīng)密度計(jì)測(cè)定重復(fù)利用，合并有近白色固體的流分，經(jīng)美國(guó)安捷倫公司生產(chǎn)agilent1100高效液相色譜儀檢測(cè)，得到純度達(dá)80%的莽草酸近白色固體7.43g；莽草酸近白色固體經(jīng)二氯甲烷-甲醇溶液重結(jié)晶得到莽草酸產(chǎn)品2.70g。

其中：拌樣硅膠質(zhì)量比為1：10。

二氯甲烷-甲醇-乙酸溶液是指將二氯甲烷、甲醇、乙酸按15：1：0.1的體積比混合而成的溶液。

二氯甲烷-甲醇溶液是指將二氯甲烷、甲醇按5：1的體積比混合而成的溶液。

⑺乙醇洗脫液采用河南鞏義市予華儀器有限公司生產(chǎn)的re-501型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀于壓力0.075mpa、水浴溫度55℃的條件下經(jīng)減壓蒸干，經(jīng)日本島津公司生產(chǎn)的shimadzuuv-240紫外分光光度計(jì)檢測(cè)，得到純度超過(guò)50%的雪松松針總黃酮16.16g。

實(shí)施例2一種雪松松針中同時(shí)制備莽草酸和總黃酮的方法，包括以下步驟：

⑴將新采集的雪松松針置陰涼處，涼干，得到干燥的雪松松針。取0.3kg干燥的雪松松針置于上海雅程儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的yc-10型多功能提取罐中，加入其重量10倍的自來(lái)水，于壓力0.075mpa、92℃回流提取2次，每次2h后過(guò)濾，合并提取液，得到雪松松針?biāo)嵋杭八幵Ｋ幵栏捎糜谧龃继嵝O性化合物的原料。

⑵雪松松針?biāo)嵋涸趬毫?.075mpa、水浴溫度95℃條件下采用上海雅程儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的yc-10型多功能提取罐進(jìn)行減壓濃縮水液，分別按照固液比1:3(900ml)、乙醇體積濃度70%和固液比1:1(300ml)、乙醇體積濃度85%醇沉二次，即得雪松松針醇沉液。

⑶雪松松針醇沉液于壓力0.065mpa、水浴溫度60℃的條件下采用上海雅程儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的yc-10型多功能提取罐經(jīng)減壓回收乙醇至無(wú)醇味，得60℃熱測(cè)密度為1.06的流浸膏53.65g；同時(shí)回收乙醇經(jīng)處理再次使用。

⑷流浸膏分散于其質(zhì)量4倍的水中，用昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)的kq2200b超聲清洗儀器于功率為40khz、溫度為45℃的條件下經(jīng)超聲溶解，得到雪松松針莽草酸和總黃酮濃度分別為23.18mg/ml和13.92mg/ml的粗提液。

⑸已預(yù)處理好的xad1180型大孔吸附樹(shù)脂濕法裝柱后，將雪松松針莽草酸和總黃酮粗提液以4bv/h流速上樣，收集未吸附流出液；先用4bv的水洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，收集水洗液；然后將水洗后的大孔吸附樹(shù)脂柱以4bv/h流速用體積濃度為95%的乙醇洗柱，收集乙醇洗脫液。

⑹合并未吸附流出液和水洗液；合并后的流出液和水洗液采用河南鞏義市予華儀器有限公司生產(chǎn)的re-501型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀于壓力0.075mpa、水浴溫度55℃的條件下經(jīng)減壓蒸干，得到純度達(dá)30%的莽草酸粗品38.65g；該莽草酸粗品分散于其質(zhì)量6倍的甲醇中，用昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)的kq2200b超聲清洗儀器于功率為40khz、溫度為40℃的條件下經(jīng)超聲溶解，過(guò)濾除去不溶物，與100~200目硅膠拌樣，裝柱，用二氯甲烷-甲醇-乙酸溶液快速淋洗，按1bv/瓶收集，共收集20bv的洗脫液，該洗脫液于壓力0.075mpa、水浴溫度50℃的條件下經(jīng)減壓蒸干溶劑，經(jīng)密度計(jì)測(cè)定重復(fù)利用，合并有近白色固體的流分，經(jīng)美國(guó)安捷倫公司生產(chǎn)agilent1100高效液相色譜儀檢測(cè)，得到純度達(dá)80%的莽草酸近白色固體7.02g；莽草酸近白色固體經(jīng)二氯甲烷-甲醇溶液重結(jié)晶得到莽草酸產(chǎn)品2.55g。

其中：拌樣硅膠質(zhì)量比為1：3。

二氯甲烷-甲醇-乙酸溶液是指將二氯甲烷、甲醇、乙酸按15：1：0.4的體積比混合而成的溶液。

二氯甲烷-甲醇溶液是指將二氯甲烷、甲醇按3：1的體積比混合而成的溶液。

⑺乙醇洗脫液采用河南鞏義市予華儀器有限公司生產(chǎn)的re-501型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀于壓力0.075mpa，水浴溫度50℃的條件下經(jīng)減壓蒸干，經(jīng)日本島津公司生產(chǎn)的shimadzuuv-240紫外分光光度計(jì)檢測(cè)，得到純度超過(guò)50%的雪松松針總黃酮15.20g。

實(shí)施例3一種雪松松針中同時(shí)制備莽草酸和總黃酮的方法，包括以下步驟：

⑴將新采集的雪松松針置陰涼處，涼干，得到干燥的雪松松針。取0.3kg干燥的雪松松針置于上海雅程儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的yc-10型多功能提取罐中，加入其重量10倍的自來(lái)水，于壓力0.075mpa、95℃回流提取2次，每次2h后過(guò)濾，合并提取液，得到雪松松針?biāo)嵋杭八幵?。藥渣晾干用于做醇提小極性化合物的原料。

⑵雪松松針?biāo)嵋涸趬毫?.075mpa、水浴溫度95℃條件下采用上海雅程儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的yc-10型多功能提取罐進(jìn)行減壓濃縮水液，分別按照固液比1:3(900ml)、乙醇體積濃度70%和固液比1:1(300ml)、乙醇體積濃度85%醇沉二次，即得雪松松針醇沉液。

⑶雪松松針醇沉液于壓力0.065mpa、水浴溫度60℃的條件下采用上海雅程儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的yc-10型多功能提取罐經(jīng)減壓回收乙醇至無(wú)醇味，得60℃熱測(cè)密度為1.05的流浸膏58.39g；同時(shí)回收乙醇經(jīng)處理再次使用。

⑷流浸膏分散于其質(zhì)量5倍的水中，用昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)的kq2200b超聲清洗儀器于功率為40khz、溫度為50℃的條件下經(jīng)超聲溶解，得到雪松松針莽草酸和總黃酮濃度分別為23.18mg/ml和13.92mg/ml的粗提液。

⑸已預(yù)處理好的xad7hp型大孔吸附樹(shù)脂濕法裝柱后，將雪松松針莽草酸和總黃酮粗提液以8bv/h流速上樣，收集未吸附流出液；先用4bv的水洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，收集水洗液；然后將水洗后的大孔吸附樹(shù)脂柱以4bv/h流速用體積濃度為70%的乙醇洗柱，收集乙醇洗脫液。

⑹合并未吸附流出液和水洗液；合并后的流出液和水洗液采用河南鞏義市予華儀器有限公司生產(chǎn)的re-501型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀于壓力0.075mpa、水浴溫度55℃的條件下經(jīng)減壓蒸干，得到純度達(dá)30%的莽草酸粗品33.60g；該莽草酸粗品分散于其質(zhì)量8倍的甲醇中，用昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)的kq2200b超聲清洗儀器于功率為40khz、溫度為50℃的條件下經(jīng)超聲溶解，過(guò)濾除去不溶物，與100~200目硅膠拌樣，裝柱，用二氯甲烷-甲醇-乙酸溶液快速淋洗，按1bv/瓶收集，共收集20bv的洗脫液，該洗脫液于壓力0.075mpa、水浴溫度50℃的條件下經(jīng)減壓蒸干溶劑，經(jīng)密度計(jì)測(cè)定重復(fù)利用，合并有近白色固體的流分，經(jīng)美國(guó)安捷倫公司生產(chǎn)agilent1100高效液相色譜儀檢測(cè)，得到純度達(dá)80%的莽草酸近白色固體6.11g；莽草酸近白色固體經(jīng)二氯甲烷-甲醇溶液重結(jié)晶得到莽草酸產(chǎn)品2.22g。

其中：拌樣硅膠質(zhì)量比為1：5。

二氯甲烷-甲醇-乙酸溶液是指將二氯甲烷、甲醇、乙酸按15：1：0.4的體積比混合而成的溶液。

二氯甲烷-甲醇溶液是指將二氯甲烷、甲醇按4：1的體積比混合而成的溶液。

⑺乙醇洗脫液采用河南鞏義市予華儀器有限公司生產(chǎn)的re-501型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀于壓力0.075mpa、水浴溫度60℃的條件下經(jīng)減壓蒸干，經(jīng)日本島津公司生產(chǎn)的shimadzuuv-240紫外分光光度計(jì)檢測(cè)，得到純度超過(guò)50%的雪松松針總黃酮11.09g。

實(shí)施例4一種雪松松針中同時(shí)制備莽草酸和總黃酮的方法，包括以下步驟：

⑴將新采集的雪松松針置陰涼處，涼干，得到干燥的雪松松針。取0.3kg干燥的雪松松針置于上海雅程儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的yc-10型多功能提取罐中，加入其重量20倍的自來(lái)水，于壓力0.075mpa、95℃回流提取2次，每次2h后過(guò)濾，合并提取液，得到雪松松針?biāo)嵋杭八幵Ｋ幵栏捎糜谧龃继嵝O性化合物的原料。

⑵雪松松針?biāo)嵋涸趬毫?.075mpa、水浴溫度95℃條件下采用上海雅程儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的yc-10型多功能提取罐進(jìn)行減壓濃縮水液，分別按照固液比1:3(900ml)、乙醇體積濃度70%和固液比1:1(300ml)、乙醇體積濃度85%醇沉二次，即得雪松松針醇沉液。

⑶雪松松針醇沉液于壓力0.065mpa、水浴溫度60℃的條件下采用上海雅程儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的yc-10型多功能提取罐經(jīng)減壓回收乙醇至無(wú)醇味，得60℃熱測(cè)密度為1.07的流浸膏62.70g；同時(shí)回收乙醇經(jīng)處理再次使用。

⑷流浸膏分散于其質(zhì)量4倍的水中，用昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)的kq2200b超聲清洗儀器于功率為40khz、溫度為50℃的條件下經(jīng)超聲溶解，得到雪松松針莽草酸和總黃酮粗濃度分別為23.18mg/ml和13.92mg/ml的提液。

⑸已預(yù)處理好的d101型大孔吸附樹(shù)脂濕法裝柱后，將雪松松針莽草酸和總黃酮粗提液以8bv/h流速上樣，收集未吸附流出液；先用3bv的水洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，收集水洗液；然后將水洗后的大孔吸附樹(shù)脂柱以4bv/h流速用體積濃度為95%的乙醇洗柱，收集乙醇洗脫液。

⑹合并未吸附流出液和水洗液；合并后的流出液和水洗液采用河南鞏義市予華儀器有限公司生產(chǎn)的re-501型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀于壓力0.075mpa、水浴溫度55℃的條件下經(jīng)減壓蒸干，得到純度達(dá)30%的莽草酸粗品40.90g；該莽草酸粗品分散于其質(zhì)量4倍的甲醇中，用昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)的kq2200b超聲清洗儀器于功率為40khz、溫度為50℃的條件下經(jīng)超聲溶解，過(guò)濾除去不溶物，與100~200目硅膠拌樣，裝柱，用二氯甲烷-甲醇-乙酸溶液快速淋洗，按1bv/瓶收集，共收集20bv的洗脫液，該洗脫液于壓力0.075mpa、水浴溫度50℃的條件下經(jīng)減壓蒸干溶劑，經(jīng)密度計(jì)測(cè)定重復(fù)利用，合并有近白色固體的流分，經(jīng)美國(guó)安捷倫公司生產(chǎn)agilent1100高效液相色譜儀檢測(cè)，得到純度達(dá)80%的莽草酸近白色固體7.43g；莽草酸近白色固體經(jīng)二氯甲烷-甲醇溶液重結(jié)晶得到莽草酸產(chǎn)品2.70g。

其中：拌樣硅膠質(zhì)量比為1：2。

二氯甲烷-甲醇-乙酸溶液是指將二氯甲烷、甲醇、乙酸按9：1：0.2的體積比混合而成的溶液。

二氯甲烷-甲醇溶液是指將二氯甲烷、甲醇按4：1的體積比混合而成的溶液。

⑺乙醇洗脫液采用河南鞏義市予華儀器有限公司生產(chǎn)的re-501型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀于壓力0.075mpa、水浴溫度50℃的條件下經(jīng)減壓蒸干，經(jīng)日本島津公司生產(chǎn)的shimadzuuv-240紫外分光光度計(jì)檢測(cè)，得到純度超過(guò)50%的雪松松針總黃酮14.88g。

實(shí)施例5一種雪松松針中同時(shí)制備莽草酸和總黃酮的方法，包括以下步驟：

⑴將新采集的雪松松針置陰涼處，涼干，得到干燥的雪松松針。取0.3kg干燥的雪松松針置于上海雅程儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的yc-10型多功能提取罐中，加入其重量15倍的自來(lái)水，于壓力0.075mpa、95℃回流提取2次，每次2h后過(guò)濾，合并提取液，得到雪松松針?biāo)嵋杭八幵Ｋ幵栏捎糜谧龃继嵝O性化合物的原料。

⑵雪松松針?biāo)嵋涸趬毫?.075mpa、水浴溫度95℃條件下采用上海雅程儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的yc-10型多功能提取罐進(jìn)行減壓濃縮水液，分別按照固液比1:3(900ml)、乙醇體積濃度70%和固液比1:1(300ml)、乙醇體積濃度85%醇沉二次，即得雪松松針醇沉液。

⑶雪松松針醇沉液于壓力0.065mpa、水浴溫度60℃的條件下采用上海雅程儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的yc-10型多功能提取罐經(jīng)減壓回收乙醇至無(wú)醇味，得60℃熱測(cè)密度為1.10的流浸膏59.45g；同時(shí)回收乙醇經(jīng)處理再次使用。

⑷流浸膏分散于其質(zhì)量5倍的水中，用昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)的kq2200b超聲清洗儀器于功率為40khz、溫度為50℃的條件下經(jīng)超聲溶解，得到雪松松針莽草酸和總黃酮濃度分別為23.18mg/ml和13.92mg/ml的粗提液。

⑸已預(yù)處理好的ab-8型大孔吸附樹(shù)脂濕法裝柱后，將雪松松針莽草酸和總黃酮粗提液以12bv/h流速上樣，收集未吸附流出液；先用2bv的水洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，收集水洗液；然后將水洗后的大孔吸附樹(shù)脂柱以8bv/h流速用體積濃度為70%的乙醇洗柱，收集乙醇洗脫液。

⑹合并未吸附流出液和水洗液；合并后的流出液和水洗液采用河南鞏義市予華儀器有限公司生產(chǎn)的re-501型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀于壓力0.075mpa、水浴溫度55℃的條件下經(jīng)減壓蒸干，得到純度達(dá)30%的莽草酸粗品39.20g；該莽草酸粗品分散于其質(zhì)量8倍的甲醇中，用昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)的kq2200b超聲清洗儀器于功率為40khz、溫度為50℃的條件下經(jīng)超聲溶解，過(guò)濾除去不溶物，與100~200目硅膠拌樣，裝柱，用二氯甲烷-甲醇-乙酸溶液快速淋洗，按1bv/瓶收集，共收集20bv的洗脫液，該洗脫液于壓力0.075mpa、水浴溫度55℃的條件下經(jīng)減壓蒸干溶劑，經(jīng)密度計(jì)測(cè)定重復(fù)利用，合并有近白色固體的流分，經(jīng)美國(guó)安捷倫公司生產(chǎn)agilent1100高效液相色譜儀檢測(cè)，得到純度達(dá)80%的莽草酸近白色固體7.13g；莽草酸近白色固體經(jīng)二氯甲烷-甲醇溶液重結(jié)晶得到莽草酸產(chǎn)品2.58g。

其中：拌樣硅膠質(zhì)量比為1：3。

二氯甲烷-甲醇-乙酸溶液是指將二氯甲烷、甲醇、乙酸按15：1：0.2的體積比混合而成的溶液。

二氯甲烷-甲醇溶液是指將二氯甲烷、甲醇按4：1的體積比混合而成的溶液。

⑺乙醇洗脫液采用河南鞏義市予華儀器有限公司生產(chǎn)的re-501型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀于壓力0.075mpa、水浴溫度60℃的條件下經(jīng)減壓蒸干，經(jīng)日本島津公司生產(chǎn)的shimadzuuv-240紫外分光光度計(jì)檢測(cè)，得到純度超過(guò)50%的雪松松針總黃酮15.52g。

實(shí)施例6一種雪松松針中同時(shí)制備莽草酸和總黃酮的方法，包括以下步驟：

⑴將新采集的雪松松針置陰涼處，涼干，得到干燥的雪松松針。取0.3kg干燥的雪松松針置于上海雅程儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的yc-10型多功能提取罐中，加入其重量20倍的自來(lái)水，于壓力0.075mpa、90℃回流提取2次，每次2h后過(guò)濾，合并提取液，得到雪松松針?biāo)嵋杭八幵?。藥渣晾干用于做醇提小極性化合物的原料。

⑵雪松松針?biāo)嵋涸趬毫?.075mpa、水浴溫度95℃條件下采用上海雅程儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的yc-10型多功能提取罐進(jìn)行減壓濃縮水液，分別按照固液比1:3(900ml)、乙醇體積濃度70%和固液比1:1(300ml)、乙醇體積濃度85%醇沉二次，即得雪松松針醇沉液。

⑶雪松松針醇沉液于壓力0.065mpa、水浴溫度60℃的條件下采用上海雅程儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的yc-10型多功能提取罐經(jīng)減壓回收乙醇至無(wú)醇味，得60℃熱測(cè)密度為1.05的流浸膏56.52g；同時(shí)回收乙醇經(jīng)處理再次使用。

⑷流浸膏分散于其質(zhì)量3倍的水中，用昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)的kq2200b超聲清洗儀器于功率為40khz、溫度為50℃的條件下經(jīng)超聲溶解，得到雪松松針莽草酸和總黃酮濃度分別為23.18mg/ml和13.92mg/ml的粗提液。

⑸已預(yù)處理好的xad761型大孔吸附樹(shù)脂濕法裝柱后，將雪松松針莽草酸和總黃酮粗提液以8bv/h流速上樣，收集未吸附流出液；先用4bv的水洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，收集水洗液；然后將水洗后的大孔吸附樹(shù)脂柱以12bv/h流速用體積濃度為80%的乙醇洗柱，收集乙醇洗脫液。

⑹合并未吸附流出液和水洗液；合并后的流出液和水洗液采用河南鞏義市予華儀器有限公司生產(chǎn)的re-501型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀于壓力0.075mpa、水浴溫度55℃的條件下經(jīng)減壓蒸干，得到純度達(dá)30%的莽草酸粗品39.05g；該莽草酸粗品分散于其質(zhì)量4倍的甲醇中，用昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)的kq2200b超聲清洗儀器于功率為40khz、溫度為50℃的條件下經(jīng)超聲溶解，過(guò)濾除去不溶物，與100~200目硅膠拌樣，裝柱，用二氯甲烷-甲醇-乙酸溶液快速淋洗，按1bv/瓶收集，共收集20bv的洗脫液，該洗脫液于壓力0.075mpa、水浴溫度50℃的條件下經(jīng)減壓蒸干溶劑，經(jīng)密度計(jì)測(cè)定重復(fù)利用，合并有近白色固體的流分，經(jīng)美國(guó)安捷倫公司生產(chǎn)agilent1100高效液相色譜儀檢測(cè)，得到純度達(dá)80%的莽草酸近白色固體7.10g；莽草酸近白色固體經(jīng)二氯甲烷-甲醇溶液重結(jié)晶得到莽草酸產(chǎn)品2.57g。

其中：拌樣硅膠質(zhì)量比為1：2。

二氯甲烷-甲醇-乙酸溶液是指將二氯甲烷、甲醇、乙酸按9：1：0.2的體積比混合而成的溶液。

二氯甲烷-甲醇溶液是指將二氯甲烷、甲醇按2：1的體積比混合而成的溶液。

⑺乙醇洗脫液采用河南鞏義市予華儀器有限公司生產(chǎn)的re-501型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀于壓力0.075mpa、水浴溫度55℃的條件下經(jīng)減壓蒸干，經(jīng)日本島津公司生產(chǎn)的shimadzuuv-240紫外分光光度計(jì)檢測(cè)，得到純度超過(guò)50%的雪松松針總黃酮14.62g。