專利名稱：一種提取精制苦杏仁苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從植物原料中提取有效成分苦杏仁苷的方法，特別是指從馬蛋果、歐李籽、杏仁、桃仁中提取苦杏仁苷的分離精制方法。
背景技術(shù)：
苦杏仁苷是以一種芳香族氰苷，存在于大風(fēng)子科馬蛋果、薔薇科歐李、杏及桃等的種子中。研究發(fā)現(xiàn)，苦杏仁苷是治療呼吸系統(tǒng)疾病的有效成分，它通過在體內(nèi)緩慢釋放氫氰酸而麻痹抑制呼吸中樞系統(tǒng)，從而起到平喘的作用，在中醫(yī)治療中被廣泛使用，用以治療咳嗽等。但大量口服苦杏仁、苦杏仁苷易導(dǎo)致嚴(yán)重中毒，苦杏仁苷在苦杏仁酶水解下生成野櫻皮苷和杏仁氰，杏仁氰不穩(wěn)定，遇熱易分解生成苯甲醛和氫氰酸。氫氰酸與細(xì)胞粒體內(nèi)的細(xì)胞色素化酶三價鐵起反應(yīng)，抑制酶活性引起組織細(xì)胞呼吸抑制，甚至導(dǎo)致死亡。
苦杏仁苷也是一種治療癌癥的有效成分，在島國裴濟(jì)的居民中，癌癥的發(fā)生率很低，這與該國種有大量的杏樹，居民常食用其果實(shí)和種子有關(guān)，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明，苦杏仁苷對癌細(xì)胞具有很強(qiáng)的殺傷力。包括西方國家在內(nèi)的許多癌癥患者，常選用含有苦杏仁苷的制劑作為藥物。而這些制劑也給患者帶來了許多奇特的療效。生產(chǎn)苦杏仁苷提取物無疑在醫(yī)藥及保健品方面有著極大的市場。
自然界含苦杏仁苷最多的大風(fēng)子科馬蛋果，其含量達(dá)6～8％，歐李種子中苦杏仁苷含量約6％，苦杏仁和桃仁中苦杏仁苷含量約為3.0％。因此以這些原料提取高純度苦杏仁苷具有較好的應(yīng)用前景。
目前，有關(guān)苦杏仁苷提取物的研究較少，CN02100460.9從苦杏仁壓榨餅開始提取苦杏仁苷，該方法油脫除率不高，導(dǎo)致下一步的醇提工藝得到的產(chǎn)品純度不高；同時壓榨過程中高溫擠壓使得苦杏仁酶與底物苦杏仁苷長時間接觸，產(chǎn)生分解；CN02146618.1報道了從歐李籽原料提取歐李油的方法，使用己烷等有機(jī)溶劑提取歐李油，己烷價格昂貴，易燃易爆，工業(yè)化安全生產(chǎn)困難，而且產(chǎn)品會有較高的溶劑殘留，隨后涉及用低碳醇提取苦杏仁苷，但未給出具體工藝。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種通過超臨界二氧化碳萃取結(jié)合溶劑萃取、結(jié)晶制備苦杏仁苷的方法。
本發(fā)明的目的按下述方案實(shí)現(xiàn)(1).將富含苦杏仁苷的植物原料粉碎成10-40目的粉狀物，制備成原料粉；(2).將原料粉裝入萃取器，以食品級CO2為萃取劑對原料粉進(jìn)行油脂脫除，控制萃取壓力15～35MPa，溫度在31.1～60℃；含有植物油脂的二氧化碳從萃取器頂部流出，進(jìn)入分離器減壓分離去除，分離壓力4～10MPa，分離溫度10～80℃；(3).含有苦杏仁苷的渣粉從分離器底部放出，按固液比1∶3～10在渣粉中加入食用酒精，攪拌，抽濾，得抽濾液；(4).抽濾液經(jīng)蒸餾、干燥，得苦杏仁苷粗品；(5).將苦杏仁苷粗品溶解在乙醇中，低溫結(jié)晶，過濾干燥后得高純度苦杏仁苷。
如上所述的含苦杏仁苷的植物原料為馬蛋果、歐李籽、杏仁或桃仁等。
如上所述的(3)步溶劑干燥中是普通干燥、真空干燥、噴霧干燥等。
如上所述的(4)步溶解過程中還可使用超聲波手段，促進(jìn)快速溶解。
如上所述的(5)步結(jié)晶過濾干燥中還可以直接采用超聲溶解，常溫靜置過濾干燥。
本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)(1)苦杏仁苷是極性物質(zhì)，不溶解于超臨界二氧化碳流體中。超臨界二氧化碳流體可以較完全地脫除原料中的脂溶性成分。而壓榨法脫脂不干凈，殘留脂溶性成份會隨著乙醇提取過程進(jìn)入溶液，使產(chǎn)品純度下降。與傳統(tǒng)溶劑法相比，超臨界CO2為綠色溶劑，操作條件溫和，不污染環(huán)境、現(xiàn)場無火災(zāi)危險。
(2)植物種子中同時含有苦杏仁酶，壓榨脫脂過程中產(chǎn)生的擠壓和局部高溫會促進(jìn)苦杏仁酶與苦杏仁苷的接觸及反應(yīng)，導(dǎo)致苦杏仁苷收率降低，而超臨界CO2流體介質(zhì)具有溫和的操作條件和較高的萃取效率，操作溫度低，萃取時間短，萃取前后物料形態(tài)不變，苦杏仁酶始終處于較低的活性狀態(tài)，原料中的苦杏仁苷成分基本不分解。
具體實(shí)施例方式
實(shí)例1取歐李種子，粉碎成10-40目，稱取原料200克，置萃取器中通過超臨界CO2流體萃取后進(jìn)行脫油，萃取壓力30MPa，萃取溫度40℃，分離壓力8MPa，分離溫度50℃，4小時后，將渣粉由萃取器底部卸出，加入乙醇1200毫升，分三次提取，每次400毫升，合并濾液，減壓回收乙醇至適量，65℃真空干燥3小時，得棕黃色提取物11克，經(jīng)過HPLC法測定含量為55％。
取所提的提取物3克，加入少量乙醇溶解過濾，然后置于4℃冰箱靜止10小時，析出白色結(jié)晶，過濾，用少量乙醇洗滌后干燥，得1.3克，經(jīng)過HPLC檢測，含量達(dá)到98.0％。
實(shí)例2取歐李種子，置剪切式粉碎機(jī)粉碎成20-40目，稱取原料200克，置萃取器中通過超臨界CO2流體萃取后進(jìn)行脫油，萃取壓力20MPa，萃取溫度60℃，分離壓力9MPa，分離溫度70℃，6小時后，將渣粉由萃取器底部卸出，加入乙醇1200毫升，分三次提取，每次400毫升，合并濾液，減壓回收乙醇至適量，65℃真空干燥干燥3小時，得棕黃色提取物12克，經(jīng)過HPLC法測定含量為50％。
所提的提取物4克，加入少量乙醇超聲溶解，然后常溫下靜止1小時，過濾得白色結(jié)晶，干燥，得1.6克，經(jīng)過HPLC檢測，含量達(dá)到92.3％。
實(shí)例3取苦杏仁種子，置剪切式粉碎機(jī)粉碎成20-40目，稱取原料200克，置萃取器中通過超臨界CO2流體萃取后進(jìn)行脫油，萃取壓力32MPa，萃取溫度50℃，分離壓力5Mpa，分離溫度30℃，4小時后，將渣粉由萃取器底部卸出，加入乙醇1500毫升，分三次提取，每次500毫升，合并濾液，減壓回收乙醇至適量，65℃真空干燥3小時，得棕黃色提取物5.5克，經(jīng)過HPLC法測定含量為60％。
取所提的提取物4克，加入少量乙醇溶解過濾，然后置于4℃靜置10小時，析出白色結(jié)晶，過濾，用少量乙醇洗滌后干燥，得1.8克，經(jīng)過HPLC檢測，含量達(dá)到95.4％實(shí)施例4取桃仁置剪切式粉碎機(jī)粉碎成10-40目，稱取原料300克，置萃取器中通過超臨界CO2流體萃取后進(jìn)行脫油，萃取壓力25MPa，萃取溫度35℃，分離壓力5MPa，分離溫度20℃，4小時后，將渣粉由萃取器底部卸出，加入乙醇900毫升，分三次提取，每次300毫升，合并濾液，減壓回收乙醇至適量，倒入白磁盤后在真空干燥器65℃干燥3小時，得棕黃色提取物5.8克，經(jīng)過HPLC法測定含量為58％。
取所提的提取物4克，加入少量乙醇溶解過濾，然后置于4℃靜置10小時，析出白色結(jié)晶，過濾，用少量乙醇洗滌后干燥，得2.1克，經(jīng)過HPLC檢測，含量達(dá)到93.0％。
權(quán)利要求
1.一種提取精制苦杏仁苷的方法，其特征在于包括如下步驟(1).將富含苦杏仁苷的植物原料粉碎成10-40目的粉狀物，制備成原料粉；(2).將原料粉裝入萃取器，以食品級CO2為萃取劑對原料粉進(jìn)行油脂脫除，控制萃取壓力15～35MPa，溫度在31.1～60℃；含有植物油脂的二氧化碳從萃取器頂部流出，進(jìn)入分離器減壓分離去除，分離壓力4～10MPa，分離溫度10～80℃；(3).含有苦杏仁苷的渣粉從分離器底部放出，按固液比1∶3～10在渣粉中加入食用酒精，攪拌，抽濾，得抽濾液；(4).抽濾液經(jīng)蒸餾、干燥，得苦杏仁苷粗品；(5).將苦杏仁苷粗品溶解在乙醇中，低溫結(jié)晶，過濾干燥后得高純度苦杏仁苷。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的含苦杏仁苷的植物原料為馬蛋果、歐李籽、杏仁或桃仁。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的(3)步溶劑干燥中是普通干燥、真空干燥或噴霧干燥。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的(4)步溶解過程中還可使用超聲波手段，促進(jìn)快速溶解。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的(5)步結(jié)晶過濾干燥中還可以直接采用超聲溶解，常溫靜置過濾干燥。
全文摘要
一種提取精制苦杏仁苷的方法是將富含苦杏仁苷的植物原料粉碎成粉狀物，制成原料粉；以CO
文檔編號C07H15/00GK1594340SQ20041001238
公開日2005年3月16日 申請日期2004年7月2日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月2日
發(fā)明者侯相林, 杜俊民, 齊永琴 申請人:中國科學(xué)院山西煤炭化學(xué)研究所